高效液相色谱仪的系统由储液器 、泵 、进样器 、色谱柱 、检测器 、记录仪等几部分组成 。储液器中的流动相被高压泵打入系统 ,样品溶液经进样器进入流动相 ,被流动相载入色谱柱(固定相) 内 , 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数 , 在两相中作相对运动时 , 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程 , 各组分在移动速度上产生较大的差别 , 被分离成单个组分依次从柱内流出 , 通过检测器时 , 样品浓度被转
工作原理
高效液相色谱仪的系统由储液器 、泵 、进样器 、色谱柱 、检测器 、记录仪等几部分组成 。储液器中的流动相被高压泵打入系统 ,样品溶液经进样器进入流动相 ,被流动相载入色谱柱(固定相) 内 ,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数 ,在两相中作相对运动时 ,经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程 ,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时 ,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪 ,数据以图谱形式打印出来 。[1]
换成电信号传送到记录仪 ,数据以图谱形式分配系数与组分 、流动相和固定相的热力学性质有关,也与温度 、压力有关 。在不同的色谱分离机制中 ,K有不同的概念 :吸附色谱法为吸附系数 ,离子交换色谱法为选择性系数 (或称交换系数) ,凝胶色谱法为渗透参数 。但一般情况可用分配系数来表示 。[1]
在条件(流动相 、固定相 、温度和压力等)一定 ,样品浓度很低时(Cs 、Cm很小)时 ,K只取决于组分的性质 ,而与浓度无关 。这只是理想状态下的色谱条件 ,在这种条件下 ,得到的色谱峰为正常峰 ;在许多情况下 ,随着浓度的增大 ,K减小 ,这时色谱峰为拖尾峰 ;而有时随着溶质浓度增大 ,K也增大 ,这时色谱峰为前延峰 。因此 ,只有尽可能减少进样量 ,使组分在柱内浓度降低 ,K恒定时 ,才能获得正常峰 。